在科研探索的征途中，高效液相色谱仪（HPLC）作为实验室的得力助手，其稳定运行直接关系到实验数据的准确性与科研项目的进展。今天，我将结合个人经验，深入分享几点关于HPLC维护的关键心得，旨在通过实际案例增强内容的逻辑性和可读性，助力各位同仁更好地掌握这一精密仪器的日常保养与故障排除技巧。

 

1. 滤头的清洗艺术：预防堵塞，确保流畅

 

在HPLC的日常使用中，滤头的清洁往往被忽视，却直接关系到流动相的质量与实验的稳定性。记得有一次，实验结果显示出峰时间异常，排查后发现竟是滤头堵塞所致。这提醒我们，尽管产品手册强调需定期更换并过滤流动相，实际操作中却容易疏忽这一环节。特别是在高温环境下，滤头堵塞更为常见。

 

优化策略：我采用10%稀硝酸进行超声清洗10分钟，有效去除附着物，随后用纯水彻底冲洗，确保无残留。建议设定定期清洗计划，特别是当流动相中含有盐分时，更应增加清洗频率。此外，每次更换流动相前，都应检查其过滤状态，避免隔夜水直接使用。

 

2.泵的维护：压力稳的秘诀

 

当实验过程中发现压力过高、波动较大时，那很有可能是泵的单向阀出问题了。我一般首先找一张干净的A4纸，用扳手小心的把单向阀取出来放上面，注意单向阀的方向，一般厂家都会有个标记，注意不要弄反方向。

 

取出来之后用洗耳球吹一下，正常的情况应该是一边可以吹透一边不行，否则就是有问题了。清洗一般用甲醇超声即可，要是问题严重的话可以先用5%稀硝酸超声10min，接着用纯水清洗干净并超声10min，最后再用甲醇超声10min。

 

注意稀硝酸超声后一定要用纯水洗净超声才可用甲醇超声。单向阀安装之后要注意监测是否漏液，压力是否正常。清洗瓶中的液体要经常查看和更换，若液体不够会影响泵的清洗和仪器的自检，实验室的戴安U3000就有一次因为清洗瓶中异丙醇不够，一直不能通过自检，等到发现之后已经浪费了大半天的时间。

 

3. 检测池的深度清洗

 

检测池一般不用常拆，我之所有拆的经验是因为样品把管路堵了，系统压力很高，通过一系列的排除发现其他地方没有问题，于是把柱子卸掉，用注射器从流通池进口打溶剂，发现溶剂不能从出口出来，于是确定检测池这块有问题，叫工程师太费劲就自己拆了洗。

 

不同型号液相的具体构造不一样，所以建议大家在动手之间把说明书多研究几遍，拆的时候同样准备一张干净A4纸，两个烧杯一大一小，里面放好甲醇。

 

依利特的检测池比较容易拆开，把如上图两个螺丝小心拧松，就可以把检测池拿出来，如下图：

 

 

再小心把中间的螺丝拧松就可以完全把检测池拿出来了，因为之间确定检测池管路堵了，但是不确定是进口还是出口，所以接下来要把管路分别卸下来，注意用标记笔标明进出口的位置，以免安装的时候弄混淆。

 

如下图，朝上的拍出来的两个孔是接检测器电路的，我们在后续安装完毕后务必保持这两个位置的干燥，而没有拍出来的两个连接管路的孔是检测池的进出口，我们需要标记。

其实初次拆开看到管路在检测器上有绕圈我是充满了疑问的，如下图，其实这是进口管，为了确保被分析物质进入检测池的时候和检测池里面的温度环境基本一致，厂家就会用到如此的设计，把进口管路在检测池上缠绕几圈，当我们拆的时候按照管路直接拆开即可。

 

 

这种耐高压的不锈钢连接管口径很细，一般堵了就难以再生了，不过也正是因为口径很细，堵的位置一般会比较靠前，所以通常的做法就是先剪掉5~10cm再从注射器试试是否依旧堵塞，若没法办就只能换管路了。

 

借着这个机会还可以把检测池清洗一下，待把管路卸去后直接把整个检测池放进甲醇超声，若有需要还可以把检测池拆开对立面进行超声清洗。

 

但是进行这个步骤要注意不要在石英玻璃上留下刻痕，而且每个石英玻璃都有一个垫圈，清洗后注意要记得安装否则会漏液，还有安装的时候螺丝不要太紧，记住之前打开时候的力道，刚好就好，否则石英玻璃会被压碎。当对上述各部件完成清洗之后就可以进行复原安装了，要记得检测池后面两个接电路的孔要保持干燥，可以用吹风吹干。

 

另外由于出口管直接排废液，我当时装的时候就用了比较短的（大概10cm）不锈钢管，然后随便接上一根管路到废液桶，结果出了如下问题：梯度洗脱的时候，当甲醇和水的比例跑到60%左右的时候，会出现一系列的有规律的大峰，明显不是我的样品峰。

 

由于之前做制备液相改短管路的时候遇到过，所以我很快的判断这是因为我的出口管太短不耐压所致。由于手上没有多余的不锈钢管所以我用了小口径的PEEK管代替，为了确保足够耐压我用了足足50cm，安装完毕，再次检测，仪器恢复正常。

 

其实在做制备液相的时候为了提高组分接收的纯度，我们经常会采取改短检测器出口管路，但是这种做法带来的结果就是容易产生气泡，反而影响实验结果。所以大家在更换检测池出口管路的时候尽量维持管路原来的长度，要想减短可以用一个备压管。

 

结语

 

HPLC出问题是正常的，每次遇到问题我总这么想，这么贵重的仪器只要按照说明做，一般的拆装应该不会对仪器造成硬伤，所以自己经常动手，以上的一点心得拿出来分享希望对大家有帮助，谢谢各位的关注！

来源：Internet

关键词： HPLC维护