案例背景

问题：液质使用三氟乙酸（TFA）作为流动相时，无法检测到特定杂质的色谱峰。

 

 

分析与调查

猜想：可能出在两个方面：色谱柱的改性或不同批次色谱柱之间的差异。

 

色谱柱问题调查

色谱柱改性的可能性：我们初步排除了色谱柱改性的可能性，因为色谱柱使用时间较短，且其他杂质的检测未受影响，只有特定杂质出现了穿越现象。

 

批次差异：尽管我们无法完全排除不同批次色谱柱之间的差异，但我们的主要目标是确保杂质能够被检测出来，而不必深究色谱柱的具体问题。

 

深入分析

分子量信息缺失：我们发现质谱无法找到特定杂质的分子量信息，这可能与流动相中存在的三氟乙酸有关。三氟乙酸作为一种强酸，可能会影响质谱的检测。

信号抑制：我们注意到低浓度的全氟羧酸能够减少信号抑制，这为我们提供了一个可能的解决方案。

 

解决方案

为了能够追踪到杂质，做了以下两个行动方案：

 

1.LCMS转移：为了确认杂质，通常将原始分析方法直接转移到液相色谱-质谱联用（LCMS）上。这种方法易于识别，流动相为0.05% TFA乙腈和水。由于杂质分子较小，且TFA通过增加水的电导率和表面张力抑制了杂质的离子化效率，这有助于提高检测的灵敏度。

 

2.流动相调整：尝试将流动相更换为甲酸铵体系，并调整分析方法。这样做后，杂质出现在主峰之后，使得质谱能够成功检测到分子量。

 

拓展解决方案

除了上述方案，此问题还能从这两个角度去考虑解决：

 

二维色谱：在这种情况下，二维色谱技术可以提供帮助，但其操作相对复杂。需要考虑阀切换时间、定量环大小以及阀切换引起的基线波动等问题，这些都可能对检测低水平杂质的峰构成挑战。

 

简易方法：作为一种更简单的替代方案，可以在LC检测器后面接了一根短管，使用离心管收集杂质，然后进行质谱检测。这种方法虽然简单，但能够有效地分离并检测到杂质。

 

拓展知识点

三氟乙酸（Trifluoroacetic Acid, TFA）是一种在化学实验室中广泛使用的有机酸。它的独特性质使其在多种化学反应中扮演着重要角色。三氟乙酸抑制电离的原因主要有下面几个方面：

 

溶剂效应研究：由于其低亲核性，TFA常用于研究反应的溶剂效应。

 

催化作用：TFA可以催化多种酸催化的化学反应，后处理简单，可通过减压蒸馏去除。

 

形成气相离子对：TFA的负离子可以与分析物的正离子形成气相离子对，这会减少分析物的电离效率，从而降低质谱信号的强度。这种离子对的形成会导致带电离子的中性化，减少了能够被质谱检测器检测到的离子数量。

 

影响电喷雾过程：TFA的高电导率和表面张力可能导致电喷雾过程中的喷雾不稳定，从而影响分析物的电离效率。在电喷雾过程中，需要一定的电压来维持喷雾，而TFA的存在可能使得达到喷雾起始所需的电压接近于产生电晕放电的电压，导致喷雾不稳定或信号减弱。

 

pH值的降低：TFA能够降低流动相的pH值，这可能会影响分析物的电荷状态，从而影响其电离效率。在低pH值下，某些碱性化合物可能会质子化，减少其在正离子模式下的电离。

 

与质谱检测器的兼容性问题：TFA作为一种不挥发性酸，可能在质谱检测器中引起污染，影响其性能。

来源：研发分析之路

关键词： 液质