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微生物菌种传代与保存方法

嘉峪检测网 2025-06-05 19:05

导读:本文详细介绍了菌种代号的意义、菌种传代方法和菌种保存方法等内容。

菌种代号的意义

菌种代号是微生物分类、保藏及研究中使用的唯一标识,包含以下信息:

1、保藏机构缩写

ATCC:美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)。

CMCC:中国医学细菌保藏管理中心

CGMCC:中国普通微生物菌种保藏管理中心。

DSMZ:德国微生物和细胞培养物保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen)。

NCTC:英国国家典型培养物保藏中心。

例:Escherichia coli ATCC 25922。

2、分类学信息

包含属名(Genus)、种名(Species),如Bacillus subtilis(枯草芽孢杆菌)。

3、菌株特性

可能标注特殊功能(如产酶、抗性)、致病性(如BSL-2)或来源(分离环境、宿主)。

4、内部编号

保藏机构分配的序列号(如CGMCC 1.2345),或实验室自定义编号(如Lab-001)。

 

菌种传代方法

菌种传代是指将菌种从一个培养物转移到另一个新鲜培养基上进行培养的过程,以保持菌种的活性和纯度。常见方法如下:

1‌、斜面传代法‌

‌适用菌种‌:适用于细菌、酵母菌等生长较快的微生物。

‌操作步骤‌:在无菌条件下,用接种环从原菌种斜面上挑取少量菌苔,在新的斜面培养基上从底部向上划“Z”字形或“S”形曲线,使菌苔均匀分布在斜面上。接种后,将斜面培养基置于适宜温度下培养。

‌注意事项‌:接种环使用前需在火焰上充分灼烧灭菌,待冷却后再挑取菌苔;划线时要注意力度和角度,避免划破培养基表面。

2‌、液体传代法‌

‌适用菌种‌:适用于细菌、放线菌等在液体培养基中生长良好的微生物。

‌操作步骤‌:用无菌移液管吸取一定量的原菌种培养液,加入到新鲜的液体培养基中,摇匀后置于适宜温度下振荡培养或静止培养。

‌注意事项‌:移液管使用前要进行灭菌处理;加入菌种培养液的量要适当,一般为液体培养基体积的5%-10%。

‌3、穿刺传代法‌

‌适用菌种‌:常用于细菌、酵母菌等,尤其适用于保存一些厌氧菌或半厌氧菌。

‌操作步骤‌:用接种针从原菌种斜面上挑取少量菌苔,垂直刺入半固体培养基的中心,直至接近管底,然后沿原穿刺线将接种针退出。接种后,将培养管置于适宜温度下培养。

‌注意事项‌:接种针要尖锐、无菌;穿刺时要保持垂直,避免弯曲或倾斜。

 

菌种保存方法

菌种保存的目的是使菌种在较长时间内保持其生物学特性和遗传稳定性,以便随时取用。常见的保存方法有以下几种:

1‌、斜面低温保存法‌

‌原理‌:将菌种接种在适宜的斜面培养基上,待菌种生长良好后,置于4℃冰箱中保存。低温可以降低菌种的代谢活动,延长其存活时间。

‌适用菌种‌:适用于大多数细菌、酵母菌和霉菌。

‌保存期限‌:一般可保存数周至数月,需定期传代。

‌操作要点‌:斜面培养基的制备要符合菌种生长要求;保存过程中要注意防止斜面培养基干裂和污染。

‌2、甘油管保存法‌

‌原理‌:将菌种与无菌甘油溶液混合,使甘油终浓度达到15%-30%,然后置于-20℃或-80℃冰箱中保存。甘油可以降低冰点,减少冰晶对菌种细胞的损伤。

‌适用菌种‌:适用于各种细菌、酵母菌和部分放线菌。

‌保存期限‌:在-20℃下可保存1-2年,在-80℃下可保存数年。

‌操作要点‌:甘油溶液要无菌;混合时要充分振荡,使菌种均匀分布在甘油溶液中;保存管要密封良好,防止水分蒸发。

‌3、冷冻干燥保存法‌

‌原理‌:将菌种悬浮在含有保护剂的溶液中,快速冷冻后在真空条件下使水分升华,从而得到干燥的菌种制品。冷冻干燥可以最大程度地减少菌种细胞内的水分,降低细胞的代谢活动,延长菌种的保存时间。

‌适用菌种‌:适用于大多数微生物,尤其是对冷冻和干燥较为敏感的菌种。

‌保存期限‌:可保存数年至数十年。

‌操作要点‌:保护剂的选择和浓度要适宜;冷冻干燥过程要严格控制温度和真空度;保存后的菌种制品要在低温、干燥、避光的条件下保存。

‌4、液氮超低温保存法‌

‌原理‌:将菌种悬浮在含有冷冻保护剂的溶液中,直接投入液氮(-196℃)中保存。超低温可以使菌种的代谢活动几乎完全停止,从而长期保持菌种的活性。

‌适用菌种‌:适用于各种微生物,尤其是难以保存的菌种。

‌保存期限‌:理论上可无限期保存。

‌操作要点‌:冷冻保护剂的选择和浓度要合适;投入液氮时要迅速,避免菌种在液氮表面停留时间过长而受到损伤;取用菌种时要使用专门的工具,防止液氮对操作人员造成冻伤。

 

来源:Internet

关键词: 菌种

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