导 读

 

在高效液相色谱（HPLC）等色谱分析中，流动相的选择直接关系到分析结果的准确性和可靠性。近期，本实验室在使用乙酸铵水溶液作为流动相时，频繁出现基线极度不稳定的现象，而其他流动相（如磷酸水）则未出现类似问题。本案例将详细分析这一现象，并探讨其可能的原因及解决方案。

 

现象描述

 

一段时间以来，本实验室多位同事反映，在使用乙酸铵水溶液作为流动相进行药物分析时，基线出现极度不稳定的现象，表现为基线呈现锯齿状波动。然而，在使用其他流动相（如磷酸水）时，并未出现类似问题。一开始，我们认为这是由于排气不干净导致的，但由于该问题并未对检测产生实质性影响，因此并未深入探究。

 

然而，随着时间的推移，这种现象在实验室中变得日益频繁。为了找出问题的根源，我们决定进行详细的排查。

 

 

原因分析

 

经过排查，我们发现了可能导致基线不稳定的两个原因：

 

排气时间不足：在实验室中，我们习惯上在更换流动相后进行排气，但排气时间一般只有2~3分钟。由于排气时间不足，管路中可能残存有微量的气泡。这些气泡在流动相通过检测器时会产生干扰，导致基线出现锯齿状波动。

 

流动相配置不均匀：在配置乙酸铵水溶液流动相时，我们往往将乙酸铵等缓冲盐刚溶解就开始使用，很少进行摇匀操作。这导致流动相中可能存在未溶解的固体颗粒或气泡，尤其是在滤头上。这些气泡或颗粒会进一步影响基线的稳定性。

 

解决方案

 

针对以上两个原因，我们提出了以下解决方案：

 

延长排气时间：在更换流动相后，应确保排气时间足够长，以便将管路中的气泡彻底排出。建议排气时间不少于5分钟，并观察管路中是否仍有气泡产生。

 

充分摇匀流动相：在配置流动相时，应确保将所有组分充分溶解并摇匀。特别是对于含有缓冲盐的流动相，如乙酸铵水溶液，应在溶解后进行充分摇匀操作，以避免固体颗粒或气泡的产生。

 

按照上述解决方案实施后，我们再次进行了实验验证。结果显示，基线稳定性得到了显著提高，锯齿状波动现象明显减少。这证明了延长排气时间和充分摇匀流动相是解决基线不稳定问题的有效方法。

 

总结

 

本案例通过分析乙酸铵水溶液作为流动相时基线不稳定的现象，探讨了可能的原因及解决方案。通过延长排气时间和充分摇匀流动相，成功解决了基线不稳定的问题，提高了药物分析的准确性和可靠性。这一案例对于其他类似问题的解决也具有一定的借鉴意义。

 

 

来源：研发分析之路

关键词： 药物分析 流动相