根据中国药典通则1101无菌检查法的最新要求，阳性对照试验的频次和必要性需基于质量风险管理的综合评估。以下从法规调整、风险评估维度及执行策略三个方面展开扩展说明：

 

一、法规背景与核心调整

2025年版药典对阳性对照试验的要求从“每批必做”改为基于风险动态调整，与国际药典（如USP、EP）接轨。核心变化包括：

取消强制每批阳性对照：允许实验室通过风险评估减少频次，但需提供充分的数据支持。

抑菌性产品冲洗量限制：总冲洗量从≤1000ml/膜降至≤500ml/膜，且方法适用性验证中即使抑菌性未完全消除，也不得增加冲洗量。

 

二、阳性对照频次的风险评估维度

1. 产品特性（抑菌性波动及溶解度）

低风险场景：若产品抑菌成分批次间稳定（如已验证含量标准差<5%）且溶解情况较好，且方法适用性试验中冲洗量远低于500ml（如仅需200ml即消除抑菌性），可减少阳性对照频次。

高风险场景：强力抗生素、中药注射剂等如果抑菌性含量波动大的产品，或方法适用性试验需接近500ml冲洗量才能消除抑菌性时，建议每批进行阳性对照。

图中是一种三代抗生素的不同公司和内部批次的含量波动情况。所以，首先你需要了解你的产品（尤其是微生物以外的检测结果）。如果溶解情况不好，如果含量波动大，就不用再继续分析了。

2. 方法适用性验证结果

验证中若使用有明确效果（药理作用）的高效中和剂（如β-内酰胺酶）、低吸附滤膜或优化冲洗参数（降低转速、加热冲洗液）后仍抑菌残留，只能寄希望于500ml的冲洗，就需高频次阳性对照；反之若操作简单且抑菌性完全消除，可降低频次。

补充一点，如果方法适用性试验年度确认中有过失败也要高频，因为失败说明验证并不充分。

3. 人员操作与流程复杂度

操作简易性：如冲洗仅需“少量多次加入→抽干”标准动作，无特殊技巧（如无需首次冲洗需要注意溶液路线上下剧烈晃动等等无法描述内容），且人员培训合格率≥95%（通俗的说是个人培训后都会），可减少阳性对照。

高复杂性操作：涉及多次滤膜转移、中和剂浓度调试或冲洗参数动态调整时，需每批阳性对照以监控操作误差。

4. 实验室质量管理水平

高水平实验室（参考指标例如环境监测达标率100%、数据完整性强、偏差率<1%）可基于历史数据（如连续12个月阳性对照合格率100%）减少频次，例如每5批做1次。

管理薄弱实验室（如频繁出现假阴性/假阳性）需维持每批阳性对照。

 

三、阳性对照频次的执行策略

基于风险动态分级管理，频次可参考以下框架：

风险等级	评估标准	阳性对照频次建议
低风险	抑菌性稳定 + 冲洗量≤300ml + 操作简易 + 实验室管理成熟	每10批或每月1次
中风险	抑菌性轻度波动 + 冲洗量300–400ml + 操作需规范	每3批或每周1次
高风险	抑菌性波动大/新方法验证/冲洗量≥400ml/操作复杂/实验室曾出偏差	每批必做

注：频次调整需通过风险评估报告和变更控制程序审批，并定期复核（如每半年）。

 

 

结论

“抑菌性稳定、操作简单、管理成熟可减少阳性对照”符合法规精神，但需通过四步落地：

数据积累：分析至少10批产品的抑菌性波动数据和方法适用性冲洗量记录。

风险评估报告：涵盖产品特性、方法验证、人员能力、实验室历史数据等维度。

SOP修订：明确频次规则及触发条件（如方法变更后恢复每批对照）。

持续监控：每季度审查阳性对照结果与环境监测数据，频次调整后首3批需100%阳性对照。

案例：某抗生素企业通过验证酶解法（青霉素酶）将冲洗量从800ml降至200ml，结合人员操作标准化，将阳性对照从每批改为每5批1次，通过药监审计。

 

来源：Internet

关键词： 中国药典 无菌检查法 阳性对照频次