IVRT试验（体外释放试验）是表征和评价外用半固体制剂性能的有效手段，体外释放速率可以反映药物的溶解度、粒径、剂型流变性等多种理化参数，可辨别处方和工艺变化对制剂的影响，是外用制剂产品开发、质量控制、稳定性考察及产品批准后变更的重要质量控制项目。

不同于IVPT（体外透皮试验），IVRT主要用人工膜或合成膜进实验,具有可操作性强，重现性高，且灵敏度相对较高的特点。它可以有效的评估受试制剂和参比制剂是否存在差异性。早在1997年，FDA首次对IVRT试验相关研究的参数进行了阐述。后续PMDA[1]、EMA[2]、USP[3]相继阐述了IVRT试验的相关参数的设置以及可接受标准。近期，CDE[4]发布的皮肤外用化学仿制药研究技术指导原则（试行）也表明了体外释放试验对于外用半固体制剂质量研究的重要性。但是体外释放试验所反应出的药物释放速率并不是该制剂在体内的真实的释放速率，它不能预测所测释放速率的差异是否会影响体内生物利用度，也不能确定这种差异的确切性质。

 

1、IVRT的释放原理及示意图

 

对于外用半固体制剂（主要包括：乳膏剂、凝胶剂、软膏剂、糊剂、悬浮液、乳液及泡沫剂等）。其体外释放的原理我们可通过下图进行辅助说明。

样品在经过一段较短的滞后期后，药物从半固体制剂中释放到接受介质中的动力学方程为：

 

 

其中：m为药物释放量

 

Q为药物在溶液中和混悬在基质中的总量

 

Dm为半固体基质中药物的扩散系统

 

Cs为药物溶解度

 

t为释放时间

 

m对作图呈线性关系，斜率为

 

 

也是该待测物质在接受介质中的释放速率。

 

2、方法开发

 

对于体外释放试验的方法开发，主要分为以下几个步骤：

 

 

1、扩散池的选择

 

IVRT方法中最常见的装置为立式扩散池，也可以用浸没池和流通池。立式扩散池如图所示。

 

 

2、人工膜的选择

 

对于体外释放释放中人工膜的选择，各法规及指南中给出了不同的参考标准，如下表所示：

 

 

对于人工膜的处理，我们需要进行膜惰性的考察，即将膜放置在相关温度的接受液中进行孵化，考察人工膜是否会对样品的释放产生影响，（样品吸附或又到降解）至少重复测定3次。在人工膜使用前，我们还需要接受介质中浸泡（一般≥30分钟），以确保人工膜在制造时添加的增塑剂被有效除去。最后确定膜的正反面后进行使用。

 

3、分析方法的建立

 

分析方法主要是指检测时所用的高效液相或紫外色谱等检测方法，这里值得注意的是，我们在建立方法时除了分析方法要具有足够的灵敏度之外，还需考察接受介质及所用人工膜是否会对样品检测产生干扰。体外释放试验一般采用多点校正曲线法进行评价样品与参比制剂的相似程度。

 

4、体外释放试验参数的考察

 

Ø  体外释放试验需要进行考察确定的参数主要包括：上样量、接受介质、试验的时长及采样点、重复次数以及膜温度等。

 

Ø  通常建议上样量在0.3~2g之间，各指南上对上样量也有相关的要求。在上样过程中应避免产生气泡，宫体室应关闭以防止与膜接触的药物中挥发性成分蒸发导致药物成分发生改变；

 

Ø  接受介质一般为pH5~7的水性缓冲液、水以及水和醇的混合液等均一溶液，也可针对相应的药物在规定限度内加入不同比例的表面活性剂，接受介质的体积一般至少是饱和体积的3~10倍（这里也类似于溶出试验中的3~10 倍的漏槽条件）若真针对一些特殊的难溶药物，也可使用一些特殊的有机溶剂（四氢呋喃、二甲基亚砜等）；

 

Ø  对于试验时长和采样点，USP《1724》及FDA IVRT指南[5]中明确指出，试验时长通常为4~6小时，每小时至少取样1次，因体外释放速率有一定的滞后期，所以稳态动力学是根据1小时后的时间点来计算的。至少选择5个采样时间点，以保证或得良好的释放率。应精确控制采样时间，以确保采样时间在预定的耐用性考察范围内。采样后补充同等剂量的接受介质时需注意动作轻柔，避免膜下产生气泡。

 

Ø  这里的重复次数是指同时进行检测的样品数量，一般试验的样品量为6个剂量单位，也可根据不同剂型的特点，进行样品数量的增加，但是一般推荐的样品数量为6个或12个。

 

Ø  不同于溶出试验，体外释放试验膜的温度为32℃±1℃，因为皮肤表面的温度要低于体内温度，而对于一些内用的半固定产品，温度应设置为37℃±1℃，如直肠和阴道用品等。PMDA中对接受液及膜温度的控制更为严格（32℃±0.5℃），可能考虑温度对外用制剂药物的释放的影响较大。

 

IVRT试验对于外用半固体制剂的质量评价具有非常重要的作用，需要我们分析人更加深入的进行研究。以上对于体外释放度（IVRT）试验原理及方法开发的一些实验条件和评判标准为对参考文献的个人理解，仅供参考。

 

参考文献

 

[1]  PMDA 皮肤局部适用制剂（半固体制剂和贴剂）

 

[2]  EMA：外用制剂质量和等效性指南草案

 

[3]  USP《1724》_半固体药物制剂：性能测试

 

[4]  皮肤外用化学仿制药研究技术指导原则（试行）

 

 

来源：药事纵横

关键词： 外用制剂质量研究 IVRT实验