4月23日，欧洲药典委员会（European Pharmacopoeia Commission，EPC）在第181次会议上通过了一项具有里程碑意义的新通则——“高通量测序（High-throughput Sequencing，HTS）检测病毒外源因子”（2.6.41）。

 

该通则曾于2024年5月征求意见，此次采纳后，将于2025年10月在欧洲药典（Ph. Eur）第12.2期发布，并自2026年4月1日起正式生效。这标志着生物制品病毒污染检测技术在监管层面的显著进步，为行业带来新的标准和指导。

 

高通量测序（HTS，亦称下一代测序技术，NGS）是一种前沿的分子生物学技术，近年来在生物制品病毒外源因子检测领域得到广泛应用。与传统检测方法相比，HTS技术具有显著优势：它能够检测已知和未知的广泛种类病毒，且可替代部分体内检测方法，这一点也契合当前欧美大力推进削减乃至取消动物试验的监管导向。

 

新通则详细描述了HTS技术在生物制品病毒外源因子检测中的应用，涵盖疫苗、重组蛋白、用于基因治疗的病毒载体以及用于细胞治疗的细胞制剂等多种生物制品。

 

通则关键内容包括：

 

HTS工作流程：通则详细阐述了HTS检测的各个步骤，从样本采集、核酸提取到测序数据分析，为用户提供了清晰的操作指南。

 

检测方法设计：HTS检测方法分为非靶向（non-targeted）和靶向（targeted）两种。非靶向HTS旨在全面检测样本中的所有病毒序列，而靶向HTS则专注于特定病毒或病毒家族。通则对这两种方法的设计原则和应用场景进行了详细说明。

 

分析方法：通则介绍了三种主要的分析方法：基因组学（genomics）、病毒组学（viromics）和转录组学（transcriptomics）。基因组学侧重于分析病毒的基因组序列；病毒组学则专注于样本中所有病毒的组成和多样性；转录组学用于研究病毒在宿主细胞中的转录活性。

 

控制样本：通则强调了在常规检测中使用控制样本的重要性，包括阳性对照、阴性对照和空白对照。有助于验证检测方法的灵敏度、特异性和准确性。

 

方法验证：通则还提供了HTS方法验证的详细指南，包括选择合适的加标材料（spiking materials）和评估HTS性能特征（如灵敏度、特异性、重复性等）。此外，还强调了针对具体产品的验证需求。

 

新通则将与ICH的Q5A(R2)指南（包括HTS技术）以及世界卫生组织（WHO）的国际参考品（用于HTS检测外源病毒）报告共同推动HTS技术的标准化进程。

 

 

来源：识林

关键词： 生物药病毒 高通量测序