诺西那生钠化学结构为18个修饰的寡核苷酸组成的RNA，进行的修饰为2’-O-（2-甲氧乙基）（2’-MOE）及硫代修饰，属反义寡核苷酸药物。临床用于治疗脊髓性肌萎缩症（SMA）。SMA病因为染色体5q上的SMN1基因缺失或突变，导致SMN2不能产生足够的SMN蛋白，脊髓前角运动神经元退行性病变。Spinraza可与SMN2的mRNA前体结合，置换参与剪接的蛋白质，增加外显子的包含率，提高细胞的SMN蛋白产量，缓解SMA的临床和病理表现。

诺西那生钠注射液由Biogen Idec Ltd公司开发，2016年12月23日被美国FDA批准上市，其后已在欧盟（2017-5-30批准）、日本、加拿大、韩国等国上市。FDA和欧盟批准的适应症为脊髓性肌萎缩（SMA），规格2.4mg/ml，鞘内给药，商品名为Spinraza。原研诺西那生钠注射液于2019年获批进口中国。

诺西那生钠注射液，规格2.4mg/ml，鞘内给药，用于治疗脊髓性肌萎缩症（SMA）。本品主要使用人群包括新生儿-17岁少年。用法用量为每次给药剂量12mg/5ml，第0、14、28、63天各给药一次，然后每4个月给予一次维持剂量。

脊髓性肌萎缩症（Spinal Muscular Atrophy）已收录在卫健委等部门发布的《第一批罕见病目录》中（国卫医发〔2018〕10号，2018-5-11）。

诺西那生钠及其注射液未被任何国家药典收载。

参比制剂情况

国家药品监督管理局公布了诺西那生注射液的参比制剂，为原研进口产品，具体如下表所示：

参比制剂于2019年获批进口中国，原价70万/针，价格昂贵，故国内已有多家企业申请仿制。

2、国内申报情况

目前国内只有原研进口产品，3家诺西那生钠注射液仿制药正在申请中，具体如下表所示：

目前有3家原料药申报，目前登记状态均为I，具体如下表所示：

原料药的合成采用经典的固相合成工艺，是目前较为前沿的技术。

以上原料药及其注射液目前均未通过技术审评。

3、仿制难点

该产品采用较为前沿的工艺生产，在进行仿制或者监管机构在审评过程中均会非常谨慎。

3.1 原料药的仿制难点

原料药结构的一致性证明

如何通过合适的表征手段来证明仿制诺西那生钠原料药的结构与参比制剂中的活性物质一致？该结构确证存在较大难度。

首先是有效成分的一致性：包括序列和结构、非对映异构体及理化性质；其次是非有效成分的控制，即杂质的控制。FDA个药指南中80%的内容是关于非对映异构体研究的。

一级序列和化学结构可以通过LC、MS、NMR等手段进行表征，为了确保仿制原料药与参比制剂原料药对映异构体的一致性，需控制可能影响对映异构体组成结构的反应试剂和反应条件。在每次延伸循环后，使用适当的方法测量每个硫代磷酸酯核苷酸连接处的R/S构型比例，即优化工艺控制，以更好控制构型比例。

其分析方法的关注点如下：①正交检测，即需要使用多种分析技术对其进行分析检测；②平行检测，至少使用3批样品进行平行检测；③所用方法需经过充分验证，以证明方法的可行性。

总的来说，其仿制难点在于：原研厂家公布的数据不充分；非对映异构体的组成难以证明，并且与合成工艺参数密切相关，原研厂家并未公布工艺参数细节；简单通过序列和结构的表征很难证明仿制药和原研药活性物质的一致性。

杂质控制存在困难

杂质种类繁多，现有分析技术无法完全分离；许多杂质结构和API差异较小；杂质分析会被非对映异构体进一步复杂化。同时，FDA及ICH未发布任何关于寡核酸药杂质控制的相关指南，即杂质控制缺少具体的指导建议。

总的来说，非对映异构体是小核酸仿制药结构相似性证明的关键，也是难点所在，杂质分析是原研药和仿制药共同的难点和重点。

3.2 诺西那生钠注射液仿制关注点

本品为罕见病用药，批量较小。FDA/EMA公开了本品的处方信息，其处方组成包括二水合磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、二水合氯化钙、六水氯化镁、氢氧化钠溶液、盐酸溶液及纯化水。本品用于鞘内给药，需控制pH、渗透压、电解质在生理范围内。同时，需关注内毒素限度设定是否合理；本品为一次性无菌等渗溶液，不含防腐剂；原辅料内控标准需要满足注射剂用途。

原料药理化特征研究

EMA公开的审评报告显示其质控项目包括性状、鉴别、含量（IP-HPLC-UV-MS）、纯度和有关物质（IP-HPLC-UV-MS）、可抽取体积、pH、渗透压、不溶性微粒、细菌内毒素、无菌及包装密封性检测（采用高压泄漏法进行检测）。企业在仿制时可参考EMA或FDA公开审评报告对诺西那生钠注射液进行质量研究，并拟定合理的质量标准。

其实，原料药理化特性表征非常重要，需对自制制剂和参比制剂进行物理化学表征，以证明原料药在制剂中聚集状态或高阶结构的一致性，其表征手段包括但不限于圆二色谱法（CD）、差示扫描量热法（DSC）、粒度排阻色谱法（SEC）及超速离心沉降速度分析（SV-AUC）等，以充分证明原料药结构的一致性。

FDA说明书显示本品贮藏条件为2~8℃保存，需依据拟定贮藏条件合理设计稳定性考察条件。

4、小结

本品所用原料药的结构确证及杂质分析均存在难度，或许CDE也需要召开专家咨询会才能做出相应的决策。

目前，在中国已上市3款小核酸药物，分别为诺西那生钠注射液、英克司兰钠注射液及托夫生注射液，但国内目前均无仿制药获批上市，由于结构确证的复杂性及杂质控制所面临的挑战，此类产品的仿制面临很多困难和挑战，虽然诺西那生钠已有多家企业申报仿制，但其获批之路或许异常艰辛。

参考文献

FDA个药指南