摘 要： 建立了顶空气相色谱法同时测定10种儿童药品中甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、正庚烷、甲苯8种有机溶剂残留量。采用Agilent DB-624毛细管色谱柱（60 m×0.53 mm，3 μm）分离，程序升温，进样口温度为200 ℃，氢火焰离子化检测器温度为250 ℃，顶空平衡温度为85 ℃，平衡时间为20 min，分流比为10∶1。结果表明，8种有机溶剂能够有效分离，在各自的质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好，相关系数不小于0.998；样品的平均加标回收率为95.12%～101.92%，测定结果的相对标准偏差为0.44%～3.33%（n=6），检出限为0.01～0.07 μg/mL。18批次样品中有11批次检出乙醇，检出率61.11%，其他成分均未检出。该方法操作简单、灵敏度高、快速有效，可以为儿童药中有机溶剂的残留测定提供依据。

关键词： 顶空气相色谱法； 顶空进样； 残留溶剂； 儿童药品； 乙醇

 

残留溶剂是指在药品生产过程中使用的，但未能完全去除的有机溶剂。根据其危害程度，残留溶剂可以分为一、二、三类，并在《中华人民共和国药典》2020年版通则0861中有相关的限度要求。一类溶剂属于或极度疑似为人体致癌物或是环境危害物，二类溶剂属于可导致不可逆毒性的溶剂或属于非遗传性毒性动物致癌物质，三类溶剂则属于低潜在毒性溶剂[1‒2]。由此可见，药品中残留的有机溶剂是否能得到合理有效的控制，直接关系到药品的质量可控性与安全性[3]。然而，残留溶剂的控制和检测存在一定的难点，因为不同药品、不同企业对于同种药品的生产过程中使用的有机溶剂根据实际情况可能不尽相同，所以无法建立统一的测定方法[4]。目前常见的残留溶剂测定方法有气相色谱法[5‒8]、气相色谱-质谱联用法[9‒14]等，该方法都能同时对一种或多种溶剂进行测定，但是却未曾有专门针对儿童药品进行测定的报道。儿童药品中的有机溶剂可能是由原辅料带来，也有可能是由药品包装材料中带来，药物的基质比较复杂。考虑到甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、正庚烷和甲苯等8种溶剂在药品合成或药品生产中使用频率较高，成分的沸点较低，笔者建立顶空进样气相色谱法，对12种常见的儿童药品进行有机溶剂残留的测定，以确保儿童药品的安全、有效和质量可控。

 

1、 实验部分

 

1.1 主要仪器与试剂

气相色谱仪：GC-2010型，配FID 检测器，日本岛津公司。

顶空进样器：HSS 8650型，意大利DANI公司。

电子天平：XS205DU型，感量为0.01 mg，瑞士梅特勒-托利多公司。

二甲基亚砜：色谱纯，批号2021603，天津市光复精细化工研究所。

甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、正庚烷、甲苯：均为色谱纯，德国默克集团。

健儿消食口服液、健脾糖浆、小儿止咳糖浆、小儿五维赖氨酸糖浆、小儿感冒颗粒、小儿退热口服液、五维他口服溶液、小儿咳喘灵口服液、小儿氨酚黄那敏颗粒、小儿化痰止咳颗粒、小儿咳喘灵颗粒、复方甘草口服溶液，以上均为南宁市售药品。

1.2 色谱条件

色谱柱：Agilent DB-624石英毛细管柱(60 m×0.53 mm，3 μm，美国安捷伦科技有限公司)；柱温：程序升温，起始温度为40 ℃，保持8 min，以8 ℃/min升温至120 ℃，保持6 min，再以60 ℃/min升温至200 ℃，保持5 min；进样口温度：200 ℃；检测器温度：250 ℃；载气：氮气，流量为2.5 mL/min；分流比：10∶1；顶空平衡时间：20 min；顶空平衡温度：85 ℃；进样时间：0.5 min。

1.3 溶液配制

单一对照品储备液：分别精密称取甲醇375 mg、乙醇625 mg、乙酸乙酯625 mg、丙酮625 mg、异丙醇625 mg、四氢呋喃90 mg、正庚烷625 mg、甲苯112 mg，分别置于不同的10 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜使溶解并稀释至标线，摇匀，配制成质量浓度分别为37.5、62.5、62.5、62.5、62.5、9.0、62.5、11.2 mg/mL的单一对照品储备液。

混合对照品储备液：分别精密量取单一对照品储备液各0.1 mL，置于同一只100 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜稀释至标线，摇匀。

混合对照品溶液：精密量取混合对照品储备液2 mL，置于10 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜稀释至标线，摇匀。精密移取2 mL置于顶空瓶中，加盖密封。

空白溶液：精密量取二甲基亚砜2 mL于20 mL顶空瓶中，加盖密封。

系列混合标准工作溶液：精密量取混合对照品储备液0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 mL，分别置于不同的10 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜稀释至标线，摇匀，即得系列混合标准工作溶液。

样品溶液：若待测的药品为液体制剂，则精密量取0.1 mL置于20 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜稀释至标线，摇匀，精密量取2 mL，置于顶空瓶中，加盖密封；若待测的药品为固体制剂，则精密称取0.1 g，置于20 mL容量瓶中，加入二甲基亚砜使溶解稀释至标线，摇匀，精密量取2 mL，置于顶空瓶中，加盖密封。

 

2、 结果与讨论

 

2.1 色谱柱的选择

考察了HP-FFAP (强极性色谱柱)、DB-624 (中等极性色谱柱)、DB-5 (弱极性色谱柱)三种不同极性的石英毛细管柱对8种溶剂测定结果的影响。结果表明，DB-624型色谱柱的分离效果和理论塔板数最好，灵敏度最高，因此选择DB-624色谱柱作为工作色谱柱。

2.2 溶剂的选择

考察了二甲基亚砜和N，N-二甲基甲酰胺作为溶剂时对测定结果的影响。在同一色谱条件下，当使用二甲基亚砜作为溶剂时，8种溶剂的色谱峰面积更大，理论塔板数更高，各成分之间的分离效果更好，因此选择二甲基亚砜作为溶解用溶剂。

2.3 顶空平衡温度、平衡时间、柱流量的确定

考察了不同平衡温度(75、80、85、90 ℃)平衡20 min对测定结果的影响，发现随着温度升高，残留溶剂的色谱峰面积逐渐变大，但考虑到平衡温度过高可能导致待测组分的不稳定，所以最终选择平衡温度为85 ℃；同时考察了在85 ℃下不同平衡时间(10、20、25、30、35 min)对测定结果的影响，结果发现在20 min时各成分的色谱峰面积最大，故选择平衡时间为20 min；考察了不同色谱柱流量(2.0、2.5、3.0 mL/min) 8种溶剂的出峰情况，发现柱流量越高，出峰时间越快，当柱流量为3.0 mL/min时，乙酸乙酯峰与丙酮峰无法达到基线分离。当柱流量为2.0 mL/min时，各成分出峰时间延长，乙酸乙酯与丙酮在柱温为120 ℃时出峰，导致两者无法达到有效分离，因此最终选择色谱柱流量分别为2.5 mL/min。

2.4 专属性试验

在1.2色谱条件下，分别取空白溶剂、混合对照品溶液、加标样品溶液依次进样分析，色谱图如图1所示。从图1中可以看出，8种溶剂色谱峰之间的分离度均大于2.0，空白溶剂对测定无干扰。该方法的专属性符合要求。

 

图1   空白溶剂、混合对照品溶液、加标样品溶液气相色谱图

Fig. 1   Chromatograms of blank sample solution，standard solution and spiked sample solution

 

2.5 线性关系、检出限及定量限

精密量取系列混合标准工作溶液2 mL，置于顶空瓶中，密封，进样测定，记录色谱峰面积，以各待测成分的质量浓度(x)为横坐标，对应的色谱峰面积(y)为纵坐标，绘制标准曲线。取混合对照品储备液，用二甲基亚砜逐级稀释，测定并记录色谱峰面积，以信噪比为3对应的溶液质量浓度作为方法检出限，以信噪比为10对应的溶液质量浓度作为定量限。8 种溶剂的线性范围、线性方程、相关系数、定量限和检出限见表1。

表1   8种溶剂质量浓度的线性范围、线性方程、相关系数、检出限和定量限

Tab. 1   Linear ranges of the mass concentration，linear equations，correlation coefficients，limits of detection，and limits of quantification of the eight solvents

 

2.6 样品加标回收与精密度试验

取小儿止咳糖浆样品0.1 mL，置于20 mL容量瓶中，精密加入混合对照品储备液0.4 mL，再加入二甲基亚砜稀释至标线，摇匀，精密量取2.0 mL，置于顶空瓶中，加盖密封，摇匀，在1.2色谱条件下进样测定，平行制备6份，记录色谱峰面积并计算各种溶剂的平均回收率及相对标准偏差。样品加标回收与精密度试验结果见表2。由表2可知，8种溶剂的平均回收率为95.12%～101.92%，测定结果的相对标准偏差（RSD）为0.44%～3.33%(n=6)。

表2   样品加标回收与精密度试验结果

Tab. 2   The results of sample recovery and precision test

 

3、 结语

 

建立了顶空-气相色谱法同时测定儿童药品中8种有机溶剂(甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、四氢呋喃、正庚烷、甲苯)的残留。优化了色谱柱型号、顶空平衡时间、平衡温度以及色谱柱流量等参数条件，该方法操作简单、灵敏度高、重现性好，可用于儿童药品中多种溶剂残留量的定量检测，为保障儿童药品的质量安全提供技术支持。

 

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引用本文： 郑美玲，张明丽，胡欣怡，等. 顶空气相色谱法同时测定儿童药品中8种残留溶剂［J］. 化学分析计量，2024，33（7）：18. (ZHENG Meiling, ZHANG Mingli, HU Xinyi, et al. Simultaneous determination of 8 residual solvents in children's drugs by headspace gas chromatography[J]. Chemical Analysis and Meterage, 2024, 33(7): 18.)

来源：化学分析计量

关键词： 儿童药品 残留溶剂