导读

 

盐析是指在高浓度缓冲盐流动相遇到有机相不互溶时形成的结晶颗粒，这些颗粒会堵塞液相管路及色谱柱。在液相色谱分析中，操作不当可能导致盐析现象，这是一种由于高浓度缓冲盐与有机相不相溶而形成的结晶颗粒，这些颗粒会堵塞液相管路及色谱柱，给实验人员带来诸多不便。为了避免盐析的发生，本文给出了一些改进措施。

 

一、盐析规避措施

 

当缓冲盐浓度较高（50mM以上）时，建议在有机相中添加一定比例的水（例如乙腈/水-80:20），以避免梯度最后有机相比例过高，造成盐析。

 

夜间排样时，推荐使用四元系统，并在序列最后调出高比例水相的冲洗系统方法，以减少盐析的风险。

 

对于二元液相系统，实验结束后应切换到小流速（如0.1mL/min）进行过夜冲洗，并保持柱温箱的温度控制。

 

没有柱温箱的情况下，可以加装柱温箱，并在夜间开启空调保持房间恒温在25℃左右，因为低温更容易发生盐析。

 

色谱柱使用后通常用纯有机相封存，但建议在使用缓冲盐类流动相前后，使用高水相（如10%甲醇水）进行冲洗，冲洗量应超过10倍柱体积（例如以1mL/min流速冲洗30分钟以上），且冲洗时不关闭柱温箱。

 

选择在有机溶剂中有一定溶解性的缓冲盐，例如乙酸铵，以减少盐析的可能性。

 

使用与水混合放热的有机溶剂，如甲醇，以减少盐析的风险。

 

二、预防措施

 

色谱柱的保存和活化：色谱柱使用后应进行适当的保存和活化处理，以保持其性能和延长使用寿命。色谱柱活化能让填料充分润湿、碳链舒展彻底，也能去除色谱柱中的杂质。

 

色谱柱压力监控：色谱柱压力是判断色谱柱是否堵塞的重要指标。新色谱柱启用后，应  记录其初始压力，并在后续使用中对比压力变化，以判断色谱柱是否需要更换保护柱柱芯或冲洗。

 

来源：Internet

关键词： 液相色谱 盐析