近日，陆续收到两个β-内酰胺类药类药物的补充资料通知，其中均含有关于聚合物的补充研究内容，一例为补充研究，涉及内容如下：“聚合物：建议按以下研究思路继续完善聚合物控制：请结合原料药结构特点、制备工艺、国内外药典及相关文献，分析完善聚合物杂质信息”。一例为附条件批准，涉及内容如下“根据《中华人民共和国药品管理法》、《国务院关于改革药品医疗器械审评审批制度的意见》(国发(2015) 44号)、《关于仿制药质量和疗效一致性评价工作有关事项的公告》 (2017年第100号)和《国家药监局关于开展化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价工作的公告》(2020年第62号)的规定,经审查,本品通过仿制药质量和疗效一致性评价。请在本次补充申请批准后，继续按补充资料通知相关要求完善聚合物杂质的研究,通过补充申请形式递交相关研究资料”。从上述通知中可以看出，在β-内酰胺类抗生素/头孢菌素类药物的申报中，聚合物的研究需要越来越充分。

抗生素（Antibiotics），是指由微生物或高等动植物所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物，主要针对“细菌有而人（或其他动植物）没有”的机制发挥抑菌或杀菌作用。按照其化学结构，抗生素可以分为：喹诺酮类抗生素、β-内酰胺类抗生素、大环内酯类、氨基糖苷类抗生素等。在抗生素市场中，β-内酰胺类抗生素占据较大份额，包括头孢尼西钠、头孢唑林钠、头孢美唑钠、头孢曲松钠等。β-内酰胺环为四元环结构，张力较大，故较为不稳定，生成N-型或L-型聚合物或其他高分子聚合物，在临床使用中引发速发型过敏反应，对患者危害极大，因此对β-内酰胺类抗生素药物中的聚合物杂质进行控制就尤为重要。

在原申报资料中，参考ChP 2020年版头孢唑肟钠药典标准，使用反相色谱法控制有关物质及二聚体聚合物；由于原方法只控制了二聚物，对其他聚合物杂质无控制，专属性较差（见图1）。我们G-10方法和TSK方法对聚合物杂质继续进行了研究。使用优化后的G-10方法对样品进行检测，聚合物杂质只获得一个色谱峰（见图2），我们将该色谱峰使用二维切换技术切至有关物质方法，在二维有关物质色谱图中二聚物处有杂质响应，说明聚合物杂质可以在有关物质方法中检出，且主要杂质为二聚物杂质；将该色谱峰二维切换注入MS，获得MS数据，证明聚合物杂质主要为二聚物杂质。将样品使用优化后的TSK方法进行检测，相对于G-10，检出了较多杂质（见图3），使用各已知杂质进行定位，对各杂质进行归属，将未知杂质使用二维切换技术切至有关物质方法，在二维有关物质色谱图中二聚物处有杂质响应，说明聚合物杂质可以在有关物质方法中检出，且主要杂质为二聚物杂质；将未知色谱峰二维切换注入质谱，获得MS数据，证明未知杂质为二聚物杂质。G-10方法和TSK方法获得的质谱数据一致，证明聚合物杂质主要为二聚物杂质；通过对样品的多批次检测，证明了有关物质方法、G-10方法和TSK方法聚合物杂质检出能力基本一致。

在原申报资料中，参考ChP 2020年版头孢唑肟钠药典标准，使用反相色谱法控制有关物质及二聚体聚合物；由于原方法只控制了二聚物，对其他聚合物杂质无控制，专属性较差（见图1）。我们G-10方法和TSK方法对聚合物杂质继续进行了研究。使用优化后的G-10方法对样品进行检测，聚合物杂质只获得一个色谱峰（见图2），我们将该色谱峰使用二维切换技术切至有关物质方法，在二维有关物质色谱图中二聚物处有杂质响应，说明聚合物杂质可以在有关物质方法中检出，且主要杂质为二聚物杂质；将该色谱峰二维切换注入MS，获得MS数据，证明聚合物杂质主要为二聚物杂质。将样品使用优化后的TSK方法进行检测，相对于G-10，检出了较多杂质（见图3），使用各已知杂质进行定位，对各杂质进行归属，将未知杂质使用二维切换技术切至有关物质方法，在二维有关物质色谱图中二聚物处有杂质响应，说明聚合物杂质可以在有关物质方法中检出，且主要杂质为二聚物杂质；将未知色谱峰二维切换注入质谱，获得MS数据，证明未知杂质为二聚物杂质。G-10方法和TSK方法获得的质谱数据一致，证明聚合物杂质主要为二聚物杂质；通过对样品的多批次检测，证明了有关物质方法、G-10方法和TSK方法聚合物杂质检出能力基本一致。

综上，由于G-10方法和TSK方法控制的聚合物均能在有关物质项下进行有效控制，该聚合物杂质主要为二聚物杂质。因此G-10方法和TSK方法暂不订入质量标准。继续将有关物质方法订入质量标准以控制有关杂质及聚合物杂质。并使用上述方法对比检测自研产品和参比制剂产品，自制产品和参比制剂产品检测结果基本一致。该补充研究资料获得了批准。

图1 聚合物检测色谱图（反相色谱法）

图2 聚合物检测色谱图（G-10色谱柱）

图3聚合物检测色谱图（TSK色谱柱）

当前，研究β-内酰胺类抗生素/头孢菌素类药物聚合物杂质的方法主要是反相色谱法，G-10方法和TSK方法。反相色谱法主要对有关物质进行控制，可兼顾聚合物杂质，G-10方法和TSK方法可对聚合物杂质进行控制；不论使用何种方法控制聚合物杂质，都应该优化色谱条件，筛选可以分离检出更多杂质以及主峰与相邻杂质分离度、杂质间分离度更好地色谱条件；完善聚合物信息，研究包括分子量低于主成分及分子量介于主成分与二聚体之间的聚合杂质、二聚体、三聚体或多聚体等聚合物杂质；并结合多批次检测数据制订聚合物杂质限度。只有按照上述思路对聚合物杂质进行详细研究，才能避免因聚合物带来的补充研究工作。

 

参考文献

[1] Feng Ji, Wenlong Zhangb, Meng Wang, et al. Characterization of polymerized impurities in cefoxitin sodium for injection by two-dimensional chromatography coupled with time-of-flight mass spectrometry[J]. Talanta，2023 Nov 11.

 

 

来源：药事纵横

关键词： β-内酰胺类药物