一、目的

方法验证

目的是证实实验室能够正确地运用所选用的方法，确保该方法在实验室特定条件下的可行性和可靠性，强调实验室是否有能力按照方法要求准确地进行操作并获得准确的结果。

方法确认

是要确定该方法适用于预期的用途，确认的是方法对于特定的检测对象、检测目的以及相关应用场景的适用性，关注方法在实际应用中的有效性和实用性。

 

二、适用范围

方法验证

适用于标准方法、非标准方法以及实验室制定的方法等各种类型的方法。当实验室首次使用某一方法时，需要进行方法验证，以证明能够正确执行该方法。

方法确认

通常适用于非标准方法、实验室制定的方法以及对标准方法进行了修改或偏离的情况。当需要证明方法能满足特定需求时，就要进行方法确认。

 

三、实施主体

方法验证

一般由实验室自身实施，实验室通过一系列的实验和评估来验证其具备使用该方法的能力，确保实验人员、设备、环境等条件能够满足方法的要求。

方法确认

可以由实验室自行进行，也可以委托有资质的机构进行。对于一些复杂的、对技术要求较高的方法确认，可能会借助外部专业机构的力量来完成。

 

四、实施内容

方法验证

1.对方法的准确性进行验证，包括回收率、精密度等指标的评估，通过多次重复实验来确定结果的一致性和稳定性。

2.验证方法的检出限和定量限，确定能够可靠检测和定量的最低浓度或含量。

3.考察方法的线性范围，确保在一定的浓度或含量范围内，测量结果与样品中被测物的浓度或含量呈线性关系。

4.评估方法的抗干扰性，考察在可能存在的干扰物质存在时，方法是否仍能准确测定目标物质。

方法确认

1.确认方法的适用性，例如对于特定样品基质的适应性，不同的样品基质可能会对分析结果产生影响，需要确认方法在实际样品中的有效性。

2.评估方法的性能特征，如准确度、精密度等是否满足预期用途的要求，与方法验证不同的是，这里更侧重于方法在实际应用场景中的性能表现。

3.考虑方法的可操作性和效率，包括分析时间、成本、对操作人员的技能要求等因素，确保方法在实际工作中能够高效、便捷地实施。

4.进行不确定度评定，分析和评估测量结果的不确定度，确定其是否在可接受的范围内，以保证结果的可靠性和准确性。

 

五、结果判定

方法验证

判定实验室是否能够按照方法要求进行操作并获得准确可靠的结果。如果实验室在方法验证过程中，各项指标均符合方法规定的要求，如回收率在规定范围内、精密度满足要求、检出限和定量限达到预期等，则认为方法验证通过，实验室具备使用该方法的能力。

方法确认

判定方法是否适用于预期的用途。当方法的性能特征、适用性、可操作性等方面均满足预期的应用需求，不确定度也在可接受范围内时，认为方法确认通过，可以用于特定的检测或分析目的。

六、记录和报告

方法验证

应详细记录验证过程中的各项实验数据、分析方法、仪器设备、人员信息等，形成方法验证报告。报告内容包括验证目的、方法概述、实验步骤、结果分析、结论等，以便证明实验室对方法的掌握和运用能力。

方法确认

除了记录实验数据和结果外，还需重点记录方法与预期用途的相关性分析、不确定度评定过程等。确认报告应明确说明方法是否适用于预期用途，以及存在的限制和改进建议等，为方法的实际应用提供全面的参考依据。

 

以下是方法验证和方法确认在实际实验室中的应用场景举例：

方法验证的应用场景

化学分析实验室

实验室首次采用高效液相色谱法（HPLC）测定某种药物的含量。在使用该标准方法前，需进行方法验证。实验室要通过一系列实验来验证方法的准确性，如配制已知浓度的药物标准溶液，进行多次进样分析，计算回收率，以确保在该实验室的仪器设备、人员操作等条件下，能准确测定药物含量。同时，还要验证方法的精密度，即多次重复测定同一样品，计算测定结果的相对标准偏差（RSD），以评估方法的重复性和再现性。另外，确定方法的检出限和定量限，考察方法的线性范围等，通过这些验证实验，证明实验室能够正确运用 HPLC 法测定该药物含量，满足标准方法的要求。

微生物实验室

当实验室使用一种新的培养基来培养特定的细菌时，需要对该培养基的性能进行方法验证。例如，通过接种已知数量的目标细菌到该培养基上，在特定的培养条件下培养一定时间后，观察细菌的生长情况，计算菌落形成单位（CFU），评估培养基的生长支持能力，即准确性。同时，在不同的时间、由不同的实验人员进行多次重复实验，观察结果的一致性，以验证方法的精密度。此外，还要验证该培养基对目标细菌的选择性，即能否抑制其他非目标微生物的生长，确保该培养基在实验室条件下能稳定、准确地培养出目标细菌，从而验证该培养基用于培养特定细菌的可行性和可靠性。

方法确认的应用场景

环境检测实验室

实验室计划采用一种新的非标准方法来检测土壤中的某种新型污染物。由于没有现成的标准方法可供参考，实验室需要对该方法进行确认。首先，要确认方法对土壤样品的适用性，考虑土壤的不同类型、成分等因素对检测结果的影响。通过采集不同地区、不同类型的土壤样品，添加已知浓度的目标污染物，按照新方法进行检测，观察回收率等指标，以评估方法在不同土壤基质中的准确性和可靠性。同时，评估方法的性能特征，如方法的检出限是否能满足环境监测的要求，精密度是否在可接受范围内。此外，还要考虑方法的可操作性和效率，例如分析时间是否合理，成本是否可控等。经过一系列的确认实验，确定该方法适用于土壤中该新型污染物的检测，能够满足环境检测的实际需求。

食品检测实验室

实验室对国家标准方法进行了改进，采用了一种更快速的前处理方法来检测食品中的农药残留。为了确认改进后的方法适用于预期用途，需要进行方法确认。一方面，要考察改进后的方法对不同种类食品基质的适应性，如在水果、蔬菜、谷物等不同食品中添加相同浓度的农药标准品，进行前处理和检测，观察回收率和精密度等指标，确保方法在不同食品样品中都能准确检测农药残留。另一方面，评估方法的性能是否有所提高，如检测时间是否缩短，同时保证检测结果的准确性和可靠性不降低。此外，还需进行不确定度评定，分析改进方法可能引入的不确定度来源，如前处理过程中样品的损失、仪器测量的误差等，确定不确定度是否在可接受范围内。通过这些确认步骤，证明改进后的方法适用于食品中农药残留的检测，且在提高效率的同时能保证检测质量。

来源：墨迹CNAS和CMA

关键词： 方法验证 方法确认