在制药实验室的色谱分析工作中，手动积分是一项需要谨慎对待的操作，稍有不慎就可能影响数据的完整性，进而对药品质量把控和合规性造成挑战。本文结合 WHO 良好色谱规范与 PDA TR80 指南，探讨手动积分的合规要求、潜在风险及管理要点，为实验室人员提供操作参考。
一、手动积分的定义与适用场景
手动积分是指分析师通过色谱软件手动调整基线等参数，对色谱峰的高度或面积进行积分的过程。根据 PDA TR80 定义，这一操作可能引入人为干预风险，因此仅允许在特殊情况下使用，例如：
•复杂样品基质干扰：当样品中成分复杂，自动积分无法准确区分目标峰与干扰峰时（如多组分共洗脱或基线漂移严重）。
•仪器局限性：老旧色谱系统或软件自动积分功能不完善，无法满足分析方法要求。
•方法验证明确允许：经预先验证的标准操作程序（SOP）中明确规定可手动积分的特定情形（如 USP<621> 允许在系统适用性失败后谨慎调整）。
二、手动积分的合规性要求
（一）权限与审批流程
•授权控制：手动积分权限需严格限定于经培训的资深分析师，并通过实验室管理系统（如 LIMS）进行用户权限分配，禁止普通操作人员擅自操作。
•审批记录：每次手动积分需提前提交申请，说明原因（如“样品基质干扰导致自动积分偏差”），经技术主管或质量部门（QA）书面批准后方可执行。
（二）操作记录与追溯
•元数据留存：手动积分过程需完整记录以下信息并关联至原始数据文件：
–操作人员 ID、操作时间；–积分参数修改细节（如基线调整方式、峰起止点变化）；
–审批人姓名及审批时间。
•审计追踪：色谱软件需启用审计追踪功能，自动记录手动积分的“前 / 后” 数据对比（如原始自动积分结果与手动调整后结果），确保数据可追溯。例如，FDA 要求审计追踪需包含 “谁、何时、为何” 修改数据的完整轨迹。
（三）数据记录与报告
•书面说明：分析报告中需专节说明手动积分的原因、方法及合理性论证，附原始色谱图（标注自动与手动积分差异）。
•电子签名：若采用电子报告，需按照 21 CFR Part 11 要求进行电子签名，确保数据不可篡改。
三、风险与防控措施
（一）主要风险类型
（二）防控措施
•技术控制：
–升级色谱系统软件，设置“手动积分仅允许在锁定原始数据副本上操作” 的功能；
–采用标准化积分模板，限定可调整参数范围（如峰宽、阈值上下限）。、
•流程优化：
–建立“自动积分优先” 原则，将手动积分作为最后手段；
–定期开展积分一致性评估，对比不同分析师手动积分结果的差异。
•培训与监督：
–每年开展手动积分专项培训，结合案例分析违规后果；
–QA 部门每季度抽查手动积分记录，重点核查审批流程与数据追溯性。
四、典型违规案例与教训
峰积分参数混乱：同一序列对照品与样品积分参数不一
Specifically, laboratory tests conducted to determine multiple batches of (b)(4) API to the written specifications are deficient Deficiencies were observed in the processing methods and integration of peaks during analysis of impurities and residual solvents in various batches of (b)(4) USP. The QC Lab used different processing methods with inconsistent peak integration parameters to integrate peaks of the standards, and different lots of the product in the same HPLC/GC run, For example:
具体而言，为确定多批次 (b)(4) 原料药是否符合书面质量标准而进行的实验室检测存在缺陷。在对多批次美国药典（USP）标准下的 (b)(4) 原料药中的杂质和残留溶剂进行分析时，发现了在处理方法和峰积分方面存在缺陷。质量控制实验室在同一高效液相色谱（HPLC）/气相色谱（GC）运行过程中，使用了不同的处理方法以及不一致的峰积分参数，对标准品的峰以及不同批次的产品进行积分。例如：
A: On 5/7/2020, the Qc Lab tested two batches (# (b)(4) of (b)(4) for Impurity Profile. The lab used three different processing methods (method ID: 4159,4206, and 4239) to integrate the peaks of standards, Lot (b)(4) and Lot (b)(4) respectively. Peak integration parameters used for a US batch (b)(4) (as per processing method ID; 4206) are as below:
2020年5月7日，质量控制实验室对两个批次（用于杂质概况分析的某产品的 (b)(4) 批号）进行了检测。实验室分别使用了三种不同的处理方法（方法编号：4159、4206 和 4239），对标准品、 (b)(4) 批号和 (b)(4) 批号的峰进行积分。用于美国某产品 (b)(4) 批号（根据处理方法编号 4206）的峰积分参数如下：
Under these integration parameters, any impurity peak/s with peak area of less than (b)(4) will not be integrated that elute before (b)(4) Similarly. any unknown impurity peak/s with peak height of less than (b)(4) will not be integrated after (b)(4) and will not be accounted for towards the maximum unknown impurity specifications. The peak height for the largest known impurity (b)(4) and largest unknown impurity (b)(4) was observed to be (b)(4) and (b)(4) respectively. [he sample run tire for the impurities analysis is (b)(4) .
在这些积分参数下，任何在 (b)(4) 峰之前洗脱且峰面积小于 (b)(4) 的杂质峰将不会被积分。同样地，任何在 (b)(4) 峰之后洗脱且峰高小于 (b)(4) 的未知杂质峰也不会被积分，并且在计算最大未知杂质规格时不会将其纳入考量。已观察到最大已知杂质（b）（4）和最大未知杂质（b）（4）的峰高分别为 (b)(4) 和 (b)(4) 。杂质分析的样品运行时间为 (b)(4) 。
B: On 5/8/2020, the QC Lab tested two US batches (# (b)(4) of (b)(4) for residual solvent analysis by GC. The lab used three different processing methods (method ID: 3023, 3078 and 3090) to integrate the peaks of standards, Lot (b)(4) respectively. Peak integration parameters selected for a US batch (b)(4) ( as per processing method ID: 3078) are as below:
2020年5月8日，质量控制实验室对两个美国批次（某产品的 (b)(4) 批号）进行了气相色谱（GC）检测，以分析残留溶剂情况。实验室分别使用了三种不同的处理方法（方法编号：3023、3078 和 3090），对标准品、 (b)(4) 批号的峰进行积分。针对美国某产品 (b)(4) 批号（根据处理方法编号3078）所选择的峰积分参数如下：
Under these processing parameters, any potential unknown peak/s with peak area set loss than a specific value for specific time frame will not be integrated. The sample run time for the Impurities analysis is about (b)(4)
在这些处理参数下，在特定时间段内，任何峰面积设定值小于特定数值的潜在未知峰都不会进行积分。杂质分析的样品运行时间约为 (b)(4) 。
The firm shipped xxx batches (manufactured in 2020; and expiring in (b)(4) of (b)(4) for the US market.
贵司向美国市场销售了某数量批次的产品（生产日期为2020年，有效期为 (b)(4) ）。
手动积分管理不足：电泳图手动积分前未优化处理方法
The (b)(4) Standard Test Procedure requires electropherograms generated during the purity by NR CE- SDS be integrated first using a standard processing method, If this does not provide appropriate integration, the procedure allows modifications to optimize the processing method by making changes one at a time. Only if the method cannot be optimized, the procedure allows analysts to request to use manual integration. Review of electropherograms found no meaningful attempt was being made to optimize processing methods before manual integration. A NR CE-SDS analyst stated manual integration is being used (b)(4) % of the time.
(b)(4) 标准测试程序要求在 NR CE- SDS 纯度测试过程中生成的电泳图首先使用标准处理方法进行积分。如果不能进行适当的整合，程序允许通过逐次修改来优化处理方法，以优化处理方法。只有在无法优化处理方法的情况下，程序才允许分析人员要求使用手动积分。对电泳图的审查发现，在手动积分之前，没有对处理方法进行有意义的优化。一位 NR CE-SDS 分析员称，有 (b)(4) % 的时间使用手动积分。
手动积分规程空白：色谱手动积分操作审查程序缺失
Manual integration of chromatograms is permitted. Procedures describing when manual integration can be performed, how it is to be performed, and how it will be reviewed have not been established.
允许对色谱进行手动积分。还没有制定说明何时可以进行手动积分、如何进行手动积分以及如何对手动积分进行审查的程序。
来源：Internet
关键词：
手动积分
风险
合规要求
