在日常生活中，食品安全一直是大家关注的热点话题。为了确保我们餐桌上的猪肉安全无虞，科研人员们不断探索和优化检测方法，其中硝基呋喃类药物残留的检测便是重要一环。今天，就让我们一起走进这项科技前沿，了解UPLC-MS/MS（超高效液相色谱串联质谱）技术如何助力硝基呋喃类药物残留的检测。

 

1.认识硝基呋喃类药物

 

硝基呋喃类药物是一类人工合成的抗菌药，具有广谱抗菌活性，对大多数真菌、部分革兰氏菌和原虫有良好的抑制作用。然而，这类药物存在着强烈的生物毒性，其本体和代谢产物对人类具有致癌、致畸、致突变的副作用。因此，尽管硝基呋喃类药物的抗菌效果好、成本低，但很多国家已经禁止使用。

 

尽管硝基呋喃类药物被禁用，但由于其性价比相对较高，仍有人或组织在非法销售或使用。这些药物残留可能通过食物链进入人体，对人类健康造成潜在威胁。因此，准确、快速地检测猪肉中的硝基呋喃类药物残留至关重要。

 

2.分析方法

 

样品前处理（衍生化）：首先，取适量猪肉样品进行粉碎、匀浆。然后，用甲醇-水溶液洗涤样品，去除游离态的硝基呋喃类药物代谢物。接着，加入2-硝基苯甲醛和三氯乙酸溶液，使样品中的硝基呋喃类药物代谢物发生衍生化反应，增加其相对分子质量，便于后续质谱检测。最后，用乙酸乙酯提取衍生化产物，并用氮气吹干后定容，待测。

PS：衍生化前处理做过一次优化，将盐酸替换成10%的三氯乙酸，其优点是不仅能提供酸性环境让代谢物与2-硝基苯甲醛发生衍生化反应，还能更有效地除去样品中的蛋白质以减少干扰。硝基呋喃代谢物检测一般要求水解衍生化后将

pH 调节至7.0~7.5，查阅资料后发现，pH 在7.5~8.0的回收率和pH 在7.0~7.5 的回收率没有明显差别，故将pH范围扩大至7.0~8.0更方便试验操作。

 

色谱条件：色谱柱为ACQUITYUPLCCSHC18 2.1mm×100mm×1.7 μm）；流动相A 为乙腈，B 为0.1%的甲酸和0.5mmol/mL醋酸铵混合水溶液；柱温35 ℃；进样体积为10μL；流速为0.25mL/min；采用梯度洗脱程序0~2.00min，5%~50%A；2.01~3.00min，50%~90%A；3.01~3.20 min，90%~5% A；3.21~4.50min，5%A。

 

质谱条件：在本试验中离子源使用电喷雾离子源（ESI），正离子扫描；扫描方式：多反应监测（MRM）；电离电压：5.5kV；离子源温度：500 ℃；气

 

帘气：30psi，流速10 L/min；雾化气：35psi，流速10 L/min；辅助气：55psi，流速10 L/min；碰撞气：氩气（纯度大于99.9%），流量：270 kp；

 

3.方法验证结果

 

 

方法验证结果：在代谢物质量浓度处于 1 - 100 ng/mL 范围内时，呈现出良好的线性相关性。其检测下限统一为 0.3 μg/mL，平均回收率范围在 91.0% - 117.8%之间，相对标准偏差（RSD）为 2.9% - 7.3%。

 

结语

 

硝基呋喃类药物代谢快、半衰期短，代谢产物与蛋白质结合稳定，难直接检测原药，通常测代谢物浓度反映残留，但小分子代谢物质谱检测因特征离子少、背景干扰大，灵敏度欠佳。用 2 - 硝基苯甲醛与代谢物衍生化增分子量，用 10%三氯乙酸替代盐酸，既促反应又有效除蛋白。

 

参考文献：史兰琴,孟凤,任慧慧.UPLC-MS/MS检测猪肉中硝基呋喃类药物残留方法的优化[J].养殖与饲料,2022,21,(12):29-33.DOI:10.3969/j.issn.1671-427X.2022.12.008.

来源：研发分析之路

关键词： 药物残留